蛋白质与双缩脲试剂发生什么反应

养生饮食编辑 医普观察员
49次浏览

关键词: #蛋白质 #蛋白

蛋白质与双缩脲试剂反应呈现紫色,这一现象基于肽键与碱性铜离子的络合作用,常用于生物化学检测。反应原理涉及蛋白质肽键在碱性条件下与Cu²⁺形成紫色络合物,颜色深浅与蛋白质浓度成正比。

1. 反应原理

双缩脲试剂由氢氧化钠、酒石酸钾钠和硫酸铜组成。碱性环境使蛋白质肽键(-CO-NH-)解离,氮原子孤对电子与Cu²⁺配位形成四齿螯合物。该络合物在540nm波长处有最大吸收峰,紫色深浅直接反映肽键数量。反应特异性针对含两个以上肽键的化合物,单氨基酸无此反应。

2. 检测应用

临床生化检验常用该方法测定血清总蛋白,正常参考范围60-80g/L。操作时将试剂与样本按1:20比例混合,37℃孵育10分钟后比色。需注意高脂血症样本可能产生浑浊干扰,此时可选用双缩脲-溴甲酚绿联合检测法。实验室常用牛血清白蛋白作为标准品制作校准曲线。

3. 干扰因素

血红蛋白胆红素等色素物质可能影响比色结果,需作样本空白对照。铵离子浓度超过10mmol/L会与铜离子竞争结合,导致显色减弱。含EDTA的抗凝血浆会螯合铜离子,应避免使用。某些药物如磺胺类可能产生沉淀,需离心后取上清检测。

4. 方法优化

自动化分析仪采用两点终点法,在546nm和700nm双波长检测消除浊度干扰。微量检测可使用96孔板模式,样本量仅需5μL。为提高灵敏度,可添加表面活性剂如Triton X-100增强显色稳定性。实验室应定期验证试剂线性范围,通常要求r²≥0.995。

该反应是蛋白质定量金标准,具有操作简便、成本低廉的优势。实际应用中需结合样本类型选择合适前处理方法,异常结果应结合电泳或免疫检测复核。维护仪器比色系统的准确性对保证检测质量至关重要。

免责声明:本页面信息为第三方发布或内容转载,仅出于信息传递目的,其作者观点、内容描述及原创度、真实性、完整性、时效性本平台不作任何保证或承诺,涉及用药、治疗等问题需谨遵医嘱!请读者仅作参考,并自行核实相关内容。如有作品内容、知识产权或其它问题,请发邮件至suggest@fh21.com及时联系我们处理!

延伸阅读

点击加载更多

相关问答 头条推荐

最新推荐

怎样根治沙眼 学会这五点根治沙眼 小脑出血的原因有哪些 注意三个原因引发的小脑出血 打耳洞会流血吗 打耳洞流血如何止血 内分泌激素6项检查需要多少钱 龅牙矫正大概要花费多少钱一颗 dha宝宝什么时候吃最好 急性淋巴结炎与淋巴结核有什么区别 慢性胃炎胃下垂拉肚子怎么办 如何防止胆囊炎 掌握三招预防胆囊炎发生 治疗鼻囊肿方法哪种好 两种方法治鼻囊肿比较好 小儿消化不良呕吐腹泻怎么办 脖子两侧两根筋疼痛是怎么回事 剖腹产后持续高烧查不出原因怎么回事,怎么办 糖皮质激素有哪些常见的不良反应 干燥综合征病人脚指甲很厚怎么回事 宝宝发烧39度怎样才能快速降温 小腹到肛门痉挛性疼痛是什么原因 小孩发烧哆嗦手脚冰凉怎么回事 青少年白血病的5大症状要清楚 成人驼背可以矫正吗 成人驼背如何矫正 龟头如何清洗合适 千万别清洗过度造成龟头白斑 怀孕了右腿根部疼痛是怎么回事 面部提升微创术的定义及优点 阿尔茨海默症早期能检查出来吗 湿气重会引起黑眼圈吗 湿气重的具体症状详述 白带异常是由于什么原因造成的 3岁儿童低烧反复怎么回事 嘴巴上火起泡吃什么好 多吃五种食物来缓解 小孩流感病毒疫苗需要打吗 盐袋子热敷子宫的危害有哪些 卫喜康的功效与作用怎么样? 千山活血膏成分有多少种?含有大黄吗 兰美抒能用于儿童吗 莎尔福栓剂禁忌是什么 说明书内容有哪些 维诺沙有没有副作用 艾得辛风湿关节炎可以用吗?应该怎么用 特威凯能不能用于艾滋病感染 可兰特可以早晚服用呢 代丁治疗慢性乙型肝炎吗 儿童可以吃吗 非那雄胺片(百达英)怎么吃好