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胆道闭锁可通过体格检查、实验室检查、影像学检查、肝胆核素扫描、肝穿刺活检等方法诊断。胆道闭锁是一种先天性胆管发育异常疾病，需早期确诊干预以避免肝功能损害。
医生会观察患儿皮肤巩膜黄染程度，触摸腹部检查肝脏脾脏肿大情况。典型表现为进行性加重的黄疸伴陶土色大便，肝脏质地偏硬且体积增大。体格检查可初步判断胆汁淤积严重程度，但需结合其他检查明确病因。
血液检测包括肝功能、胆红素、胆汁酸等指标。直接胆红素显著升高伴谷氨酰转肽酶异常是特征性改变。凝血功能检查可评估维生素K吸收障碍程度。血常规可能显示血小板减少等门脉高压征象。实验室数据能反映肝细胞损伤和胆汁排泄障碍情况。
腹部超声是首选无创检查，可显示肝内外胆管发育情况，观察胆囊形态及胆汁充盈状态。磁共振胰胆管造影能三维重建胆道系统，准确判断胆管闭锁部位。部分病例需进行内镜逆行胰胆管造影直接观察胆管结构，但存在操作风险。
通过静脉注射放射性核素标记物，动态观察示踪剂经肝脏摄取和肠道排泄过程。胆道闭锁患儿示踪剂无法进入肠道，24小时后肠道仍无放射性显影。该检查对鉴别新生儿肝炎等疾病有重要价值，但需在黄疸初期进行。
通过穿刺获取肝组织进行病理学检查，可见胆小管增生、胆汁淤积及门脉纤维化等特征性改变。活检能评估肝纤维化程度，为手术预后提供依据。但属于有创操作，需严格掌握适应症，通常在非侵入性检查无法确诊时采用。
确诊胆道闭锁后需在60天内完成葛西手术，术后需长期监测肝功能，给予脂溶性维生素补充。家长应记录患儿大便颜色变化，定期复查超声和肝功能，避免高脂饮食加重胆汁淤积。母乳喂养者母亲需限制动物脂肪摄入，配方奶喂养应选择中链甘油三酯配方。术后出现发热、黄疸加重等情况需立即就医。
